Determinação do Título de Metionina

Tempo Total de Trabalho:  01 Hora.

Aparelhos:

·       Bureta Dosimat Metrohm E 645, com unidade intercambiável de 20ml.

·       Erlenmeier para  índice de Iodo, de 250 ml, com tampa.

·       Proveta graduada de 100 ml.

·       Pipetas graduadas de 1 e 20 ml.

·       Pipeta volumétrica de 50 ml.

·       Balança analítica com precisão de 0.1 mg.

·       Frasco  de polietileno de 100 ml, com tampa.

Soluções:

1.     Solução Tampão de Fosfato:

a)       Dissolver 100g de Fosfato dibásico de potássio (K₂HPO₄), em água desmineralizada e completar o volume à 1 litro, em balão volumétrico.

b)       Dissolver 100g de Fosfato monobásico de potássio (KH₂PO₄), em água desmineralizada e completar o volume à 1 litro, em balão volumétrico.

c)        Misturar 1 litro da solução (a) com 400 ml da solução (b). Estocar em frasco âmbar, com tampa.

2.     Solução de Iodeto de potássio 67 g /L:

       Dissolver 67 g de iodeto de potássio P.A. (KI), em água desmineralizada e completar o volume à 1 litro, em balão volumétrico. Estocar a solução em frasco de vidro âmbar, com tampa.

3.     Solução de Iodo 0,1 N:

   Em um bequer de 250 ml, pesar 12.7g de Iodo resublimado e dissolvê-lo em aproximadamente 50 ml de água desmineralizada. Adicionar algumas gotas de Ácido Clorídrico concentrado, para ajudar à dissolução do Iodo. Transferir para um balão volumétrico de 1 litro, com auxílio de um funil analítico.

   Adicionar ao balão, 25 ± 1g de Iodeto de Potássio P.A. homogeneizar bem a mistura e completar o volume do balão com água desmineralizada. Armazenar a solução em frasco âmbar.

·       Padronização:

    Em um erlenmeier de 250 ml, limpo e seco, pesar de 0,3 à 0,4g de Ácido Ascórbico p.a. e chamar de P esse peso em gramas. Adicionar cerca de 50 à 100 ml de água desmineralizada. Titular com a solução de Iodo a ser padronizada, utilizando indicador de Amido 1% no final da titulação. O ponto de viragem se dá na passagem da cor incolor para marrom claro.

   Chamar de V  o volume em ml gasto na titulação.

    Fazer a padronização em duplicata.

   Fator de Correção  =    113,55  x  P        

                                                V           

4.      Solução de Tiossulfato de Sódio 0,1 N:

  Em um bequer de 250 ml, pesar 27.9g de Tiossulfato de Sódio penta-hidratado P.A. e 0,2g Carbonato de Sódio anidro P.A. .

   Dissolver e completar a 1 litro, em balão volumétrico, com água desmineralizada previamente fervida. Deixar decantar durante 24 horas e padronizar. Estocar a solução em frasco âmbar.

·       Padronização:

   Em um erlenmeier de 250 ml, adicionar 20 ml de Iodo 0,1N, 20 ml de solução de Iodeto de Potássio a 10% e 100 ml de ácido sulfuríco a 20%. Titular a mistura com a solução de Tiossulfato de Sódio a ser padronizada, adicionando cerca de 1ml de Amido no final da titulação. O ponto final se dá na passagem da cor marrom para incolor.

                   Fator de Correção  =    20 x  F        

                                                        V  

Onde:

          V = ml de Tiossulfato de Sódio gasto na titulação.

         F = Fator de correção da solução de Iodo 0,1N.

5.     Solução indicadora de Amido 1%:

   Dissolver 10g de Amido solúvel em 1 litro de água desmineralizada. Aquecer até que se obtenha uma solução transparente. Resfriar e filtrar se necessário. Adicionar algumas gotas de Tolueno como preservativo.

Þ      Procedimento:

1.        Em um erlenmeier para índice de Iodo, de 250 ml, pesar 0,3  ± 0,0001g de amostra. Chamar este peso em gramas da amostra de P .

2.        Adicionar com proveta  70 ml de solução tampão de Fosfato e com pipeta volumétrica 30 ml de Iodeto de Potássio 67g/L. Dissolver bem a amostra.

3.        Adicionar 50 ml de solução de Iodo 0,1N , medidos com pipeta volumétrica.

4.        Tampar o erlenmeier, homogeneizar e deixar em repouso durante 30 minutos, ao abrigo da luz.

5.        Titular o excesso de Iodo, com  a solução de Tiossulfato 0,1N, até a coloração amarelo pálido. Adicionar 1 ml de Amido 1% e continuar a titulação até a total descoloração. Chamar de V, o volume em ml gasto na titulação de amostra.

6.        Fazer um ensaio em branco procedendo como descrito nos itens 2 à 5, sem colocar amostra. Chamar de V´ , o volume em ml gasto na titulação do branco.

7.        Fazer a análise em duplicata.

Þ      Cálculo:

                                  % p/p de MTN =   149,2 x ( V´ -  V ) x  F  x  100

                                                                      2  x  10  x  1000  x  P

Þ   =  0,746 ( V´ -  V ) x F 

                                                                            P

                                  onde:

                                            P  = Peso em gramas da amostra.

                                            V  = ml de Tiossulfato de Sódio 0,1 N gasto na titulação da amostra.

                                            V´ = ml de Tiossulfato de Sódio 0,1 N gasto na titulação do branco.

                                            F  = fator de correção da solução de Tiossulfato de Sódio 01